犬（Canine）D二聚體（D2D）ELISA檢測試劑盒該試劑盒僅用于科研實驗?產品貨號：DM-Can45228產品規格：48/96T一、ELISA 檢測原理ELISA（酶聯免疫吸附測定）核心是抗原 - 抗體特異性結合?+?酶促顯色反應，通過顏色深淺反映待測物濃度。常用類型及原理：1.?雙抗體夾心法（測大分子抗原 / 蛋白）固相包被捕獲抗體 → 加入樣本（待測抗原）→ 結合酶標檢測抗體 → 加底物顯色 → 吸光度與抗原濃度正相關。?2.?間接法（測抗體）固相包被抗原 → 樣本中待測抗體結合 → 加酶標二抗 → 底物顯色 → 吸光度與抗體濃度正相關。3.?競爭法（測小分子抗原 / 半抗原）待測抗原與酶標抗原競爭結合有限抗體 → 待測物越多，顯色越淺 → 吸光度與濃度負相關。二、試劑盒的組成三、ELISA實驗所需材料（一）試劑盒本身（核心）1.?預包被酶標板（96 孔）2.?標準品（梯度濃度）3.?酶結合物（酶標抗體 / 酶標抗原）4.?樣本稀釋液5.?洗滌液（濃縮液，使用前稀釋）6.?顯色底物液（A、B 液或單液）7.?終止液8.?封板膜 / 封板膠?（二）樣本相關1.?待測樣本（血清、血漿、細胞上清、組織勻漿等）2.?樣本處理試劑（視樣本類型）：抗凝劑（EDTA、肝素、檸檬酸鈉等）蛋白酶抑制劑（如組織樣本）裂解液、勻漿緩沖液等?（三）儀器設備1.?酶標儀（450 nm 為主，部分需雙波長）2.?洗板機（推薦）或洗板瓶 / 排槍3.?移液器（0.5–10 μL、10–100 μL、100–1000 μL）4.?移液器吸頭（帶濾芯更佳）5.?渦旋振蕩器6.?離心機（樣本處理用）7.?恒溫培養箱 / 水浴（37℃ 孵育用）8.?冰箱（2–8℃、-20℃）?（四）耗材與輔助用品1.?EP 管、凍存管2.?一次性手套、口罩3.?吸水紙 / 濾紙4.?計時器5.?去離子水 / 蒸餾水（用于洗滌液稀釋）6.?廢液缸、吸水紙?（五）可選 / 特殊實驗材料1.?封板膜 / 封板膠2.?振蕩器（微孔板搖床）3.?多道移液器（8/12 道）4.?加樣槽5.?微孔板封口膜、鋁箔（避光）?四、試劑準備的注意事項1.所有試劑按說明書指定溫度保存（2–8℃ 或 -20℃）2.避免陽光直射，酶結合物、底物需避光3.不同批號試劑不可混用4.加樣前檢查試劑是否渾濁、沉淀、變色，異常則棄用5.所有試劑開蓋后盡快使用，剩余按要求保存?五、結果計算（通用流程）1.?數據處理（1）扣除空白孔 / 本底孔吸光度（OD），得到校正 OD 值。（2）以標準品濃度為 X，校正 OD 為 Y，做標準曲線（常用四參數擬合 4PL）。 2.濃度計算（1）樣本 OD 代入標準曲線，得到理論濃度 C?。（2）若樣本經稀釋，＊終濃度：C=C0×稀釋倍數2.?有效性判定（常見）（1）空白 OD 通常 ≤ 0.1；（2）標準曲線 R2 ≥ 0.98；（3）質控（QC）在可接受范圍；（4）樣本 OD 超出曲線上限 / 下限時需重新稀釋 / 濃縮復測。?六、示例（雙抗體夾心法）標準品濃度：0、10、20、50、100、200 pg/mL測得 OD：0.05、0.12、0.25、0.58、1.10、1.95校正后 OD：0、0.07、0.20、0.53、1.05、1.90擬合曲線后，某樣本校正 OD=0.35 → 曲線讀出 C?≈30 pg/mL若樣本稀釋 5 倍，則＊終濃度 = 30 × 5 = 150 pg/mL。?
犬（Canine）糞包蟲抗原ELISA檢測試劑盒產品貨號：DM-Can45227產品規格：48/96T上海篤瑪生物科技有限公司是專注于生命科學領域的高科技企業，秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創新為宗旨”的發展理念，致力于為全球科研工作者提供高質量的生物學試劑及解決方案。本試劑盒是公司核心產品線之一，采用自主研發的高特異性抗體對，基于經典的雙抗體夾心法原理構建，可＊＊定量檢測樣本中的含量。ELISA（酶聯免疫吸附測定，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）的核心原理是：抗原與抗體的特異性免疫反應 + 酶催化底物的化學顯色反應，通過顏色深淺定量 / 定性判斷樣本中待測物濃度。試劑盒的組成ELISA 試劑盒標準操作流程（雙抗體夾心法為例）所有操作需嚴格遵循試劑盒說明書，以下為通用標準化流程，含核心操作要點：實驗前準備提前 1 小時將試劑盒所有組分從冰箱取出，室溫（20-25℃）避光平衡至室溫，酶結合物、標準品需避免陽光直射，凍干標準品需按說明書＊＊復溶、靜置。提前開啟酶標儀、洗板機，完成校準；配制工作液：濃縮洗滌液用純水稀釋至工作濃度，底物 A/B 液按 1:1 比例臨用前新鮮混合。確定實驗布局，提前規劃標準品梯度、空白對照、陰性對照、樣本重復孔的位置，避免加樣錯誤。樣本前處理血清、血漿、細胞培養上清、組織勻漿等樣本，需按說明書要求離心、稀釋，去除沉淀、脂質、溶血雜質，降低基質效應；待測濃度超出線性范圍的樣本，需用樣本稀釋液梯度稀釋后再檢測。加樣與孵育按布局，向對應孔中加入標準品梯度液、待測樣本、對照品，每孔加樣體積＊＊一致，加樣時避免槍頭觸碰孔壁、產生氣泡，加樣完成后用封板膜嚴密封口。按說明書要求，37℃恒溫避光孵育，孵育時間嚴格遵守說明書，不可隨意延長或縮短，孵育時避免封板膜翹起、液體蒸發。洗板（核心關鍵步驟）孵育結束后，快速甩去孔內液體，在吸水紙上徹底拍干殘留液體，按說明書要求用洗滌液洗板 3-6 次，每次洗板需注滿孔、靜置 30 秒后甩干，確保洗板充分，去除未結合的游離物質。洗板不徹底會導致本底飆升、結果偏差，洗板過度會導致復合物脫落、信號偏低。加酶結合物與二次孵育每孔加入＊＊體積的酶結合物工作液，封板膜密封后，按說明書 37℃恒溫避光孵育，嚴格控制孵育時間。二次洗板重復洗板操作，洗板次數、參數嚴格按說明書執行，洗板完成后徹底拍干孔內殘留液體，無可見液滴。底物顯色每孔加入新鮮混合的底物工作液，輕輕混勻后，37℃恒溫避光孵育顯色，嚴格控制顯色時間，顯色過程需避光，避免強光導致底物自發顯色、本底升高。終止反應與讀數按順序每孔加入終止液，輕輕混勻后，藍色產物會立即變為黃色，終止后 10-30 分鐘內，用酶標儀讀取 450nm 處的 OD 值，必要時設置參比波長 630nm，降低孔間誤差。數據處理以標準品濃度為橫坐標，對應 OD 值為縱坐標，擬合四參數 Logistic 曲線（優先選擇）或線性回歸曲線，根據樣本 OD 值，計算出樣本中待測靶標的濃度，結合稀釋倍數換算＊終結果。ELISA 試劑盒核心性能評價指標這是判斷試劑盒質量、是否滿足實驗要求的核心標準，也是試劑盒研發、穩定性驗證的核心依據，呼應你之前關注的加速穩定性實驗：靈敏度：分為＊低檢出限（LOD）和定量下限（LLOQ），LOD 是可檢出靶標的＊低濃度，LLOQ 是可＊＊定量的＊低濃度，數值越低，試劑盒的檢測能力越強。特異性：通過交叉反應率評估，試劑盒與靶標結構類似物的交叉反應率越低，特異性越強，檢測結果越準確，無假陽性干擾。精密度：用變異系數（CV）評估，分為板內精密度（同一塊板同一樣本重復孔 CV≤10%）、板間精密度（同批次不同板同一樣本 CV≤15%）、批間精密度（不同批次試劑盒同一樣本 CV≤20%），CV 越低，重復性越好。準確度：用加標回收率評估，向空白基質中加入已知濃度的標準品，檢測回收率需在 80%-120% 之間，越接近 100%，定量準確性越高。線性范圍：試劑盒可＊＊定量的靶標濃度區間，實驗中樣本濃度需落在該區間內，超出范圍需稀釋后檢測。穩定性：是試劑盒有效期標定的核心，分為 4 類，也是你之前關注的加速穩定性實驗的核心應用場景：實時穩定性：試劑盒在規定保存條件下，長期存放的性能穩定性，是有效期標定的金標準。加速穩定性：37℃恒溫放置 7-14 天，模擬長期保存的老化效果，快速預判試劑盒有效期。開瓶穩定性：試劑盒開封后，按規定條件存放的性能穩定性，指導開封后的使用時限。運輸穩定性：模擬運輸過程中的溫度波動、震動等條件，驗證試劑盒的運輸耐受性。結果計算1. 首先計算每個標準品、空白孔及樣本孔的平均OD值（復孔檢測時），空白孔OD值作為陰性對照，用于扣除背景干擾。2. 以標準品濃度為橫坐標（X軸，對數坐標），對應的OD值為縱坐標（Y軸，線性坐標），使用專業繪圖軟件（如Excel、GraphPad Prism）繪制標準曲線，計算回歸方程（R2值應≥0.99，確保標準曲線的可靠性）。3. 將扣除背景后的樣本OD值代入回歸方程，計算出樣本中[檢測指標]的初步濃度，再根據樣本的稀釋倍數計算出樣本的實際濃度。售后服務上海篤瑪生物科技有限公司擁有專業的技術服務團隊，為您提供全程技術支持。如您在產品使用過程中有任何疑問，或對產品質量有異議，請及時聯系我們的技術顧問，我們將在24小時內響應，為您提供實驗方案優化、問題排查等專業服務。
犬（Canine）細小病毒（CPV）ELISA檢測試劑盒 產品貨號：DM-Can45226產品規格：48/96TELISA（酶聯免疫吸附測定，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）的核心原理是：抗原與抗體的特異性免疫反應 + 酶催化底物的化學顯色反應，通過顏色深淺定量 / 定性判斷樣本中待測物濃度。一、核心邏輯（所有 ELISA 都遵循）1. 免疫識別：利用抗原（Ag）和抗體（Ab）之間高度特異性結合，只 “抓” 目標分子。2. 酶標記放大：將酶（常用 HRP、AP）標記在抗體 / 抗原上，作為信號放大系統。3. 底物顯色：酶催化無色底物生成有色產物，顏色深淺與酶量成正比，也與待測物濃度成正比。4. 比色定量：酶標儀測吸光度（OD 值），通過標準曲線計算待測物濃度。二、四大經典 ELISA 檢測原理（＊常用）1. 雙抗體夾心法（Sandwich ELISA）—— ＊常用，測大分子抗原 / 蛋白適用對象：大分子蛋白、細胞因子、激素、膜蛋白、分泌蛋白等（有多個抗原表位）。結構：捕獲抗體 → 待測抗原 → 檢測抗體（酶標 / 生物素化）。步驟邏輯：1. 固相載體（微孔板）預包被捕獲抗體（Capture Ab）。2. 加入樣本，樣本中的待測抗原（Ag）與捕獲抗體特異性結合。3. 加入酶標記檢測抗體（Detection Ab-HRP），與抗原另一表位結合，形成：捕獲 Ab - 抗原 Ag - 檢測 Ab-HRP 夾心復合物。4. 洗去未結合物質，加入底物 TMB，HRP 催化顯色。5. 加終止液，測 OD 值。顏色越深 → 抗原濃度越高。特點：特異性高、靈敏度高（pg/mL 級）。適合大分子、多表位抗原。不適合小分子（如激素、藥物小分子，表位太少夾不住）。 2. 直接法 ELISA（Direct ELISA）—— ＊簡單，測抗原適用對象：已知抗原定性 / 半定量，或包被抗原的驗證。結構：固相抗原 → 酶標一抗。步驟邏輯：1. 微孔板直接包被待測抗原（Ag）。2. 加入酶標記一抗（Primary Ab-HRP），直接與抗原結合。3. 洗板、加底物顯色、測 OD。4. 顏色越深 → 抗原量越多。特點：步驟＊少、速度快。但靈敏度低，一抗需酶標記，通用性差。科研中多用于包被效率驗證，少用于臨床 / 精確定量。 3. 間接法 ELISA（Indirect ELISA）—— 主要測抗體（如抗體滴度、自身抗體）適用對象：檢測樣本中的抗體（如 IgG、IgM、病毒抗體、自身抗體）。結構：固相抗原 → 一抗（樣本抗體） → 酶標二抗。步驟邏輯：1. 微孔板包被已知純化抗原（Ag）。2. 加入樣本，樣本中的 ** 待測抗體（Ab）** 與抗原結合。3. 加入酶標記二抗（Secondary Ab-HRP，抗人 / 抗鼠 IgG 等），識別一抗 Fc 段。4. 洗板、顯色、測 OD。顏色越深 → 樣本中抗體滴度越高。特點：靈敏度高，二抗可通用（同一酶標二抗可測多種一抗）。主要用于抗體檢測，不適合測抗原。 4. 競爭法 ELISA（Competitive ELISA）—— 測小分子抗原 / 半抗原適用對象：小分子激素、藥物、多肽、毒素、小分子代謝物（只有一個表位，無法夾心）。結構：固相抗體 / 抗原 + 酶標抗原 / 抗體與樣本待測物 “競爭結合”。有兩種常見形式，原理一致、方向相反：（1）抗體包被，酶標抗原競爭（＊常用）1. 微孔板包被捕獲抗體。2. 同時加入：樣本待測小分子抗原 + 酶標記抗原（Ag-HRP）。3. 兩者競爭結合有限的抗體位點：4. 樣本中抗原多 → 占據更多抗體 → 酶標抗原結合少 → 顯色淺。5. 樣本中抗原少 → 酶標抗原結合多 → 顯色深。6. 顯色后，OD 值與待測抗原濃度成反比。（2）抗原包被，酶標抗體競爭1. 微孔板包被已知抗原。2. 樣本待測抗原 + 酶標抗體混合加入，競爭結合抗原。3. 樣本抗原多 → 酶標抗體結合少 → 顯色淺。特點：必須用于小分子、單表位物質。標準曲線是下降型（濃度越高，OD 越低），計算時注意方向。特異性要求極高，否則易受結構類似物干擾。 三、信號系統原理（HRP + TMB ＊常見）絕大多數 ELISA 用這套：1.酶：辣根過氧化物酶（HRP）。2.底物：TMB（四甲基聯苯胺），無色。3.反應：HRP 催化 H?O?氧化 TMB → 生成藍色可溶性產物。4.終止：加硫酸（終止液），藍色變為黃色，穩定。5.讀數：450 nm 測 OD（參考波長 630 nm）。方法主要檢測對象信息與濃度關系適用分子大小典型應用雙抗體夾心法抗原（蛋白）正相關（濃度高→色深）大分子（多表位）小分子、半抗原直接法抗原正相關大分子抗原定性、包被驗證間接法抗體正相關抗體病毒抗體、自身抗體、免疫滴度競爭法抗原（小分子）負相關（濃度高→色淺）小分子、半抗原類固醇激素、藥物、多肽、毒素一句話總結雙抗體夾心法：捕獲抗體抓抗原，酶標抗體再夾心，色深 = 濃度高。間接法：抗原抓樣本抗體，酶標二抗放大，色深 = 抗體高。競爭法：樣本與酶標物搶結合位點，色淺 = 濃度高。 試劑盒的組成結果判斷一、顯色與 OD 值初判（肉眼 + 酶標儀）顯色觀察：標準品孔應呈梯度顯色（TMB 底物終止后由藍變黃）；空白 / 陰性對照基本無色。 OD 值質控（夾心法常用）：空白孔 OD ＜ 0.2 ＊高標準品 OD ＞ 1.0 樣本 OD 需落在標準曲線范圍內；超出上限→稀釋重測；低于下限→濃縮或換高敏試劑盒 二、標準曲線與對照驗證（實驗有效性）標準曲線：相關系數 R2 ≥ 0.99（越接近 1 越好） 推薦用 四參數邏輯（4PL）擬合 標準品 CV% ＜ 8% 對照孔：陰性對照（NC）：背景低，過高提示非特異結合 陽性對照（PC）：應有明顯信號，無信號則實驗失敗 樣本重復性：復孔 CV% ＜ 10%（可靠）；10%–15% 可接受；＞15% 需重測 三、結果判讀方法1. 定性判斷（陰 / 陽）計算 Cut-off 值（按試劑盒說明書，常見：NC 均值 + 2SD 或 NC×2.1） 樣本 OD ＞ Cut-off → 陽性 樣本 OD ＜ Cut-off → 陰性 接近 Cut-off → 復測確認 2. 定量判斷（濃度計算）用標準曲線將樣本 OD 值換算為目標物濃度 結果需在試劑盒檢測范圍內 3. 半定量判斷（效價 / 相對水平）以＊高稀釋倍數仍呈陽性為效價，用于抗體滴度等 四、常見異常與處理高背景 / 花板：優化封閉、洗滌，降低抗體濃度 無顯色 / 顯色過淺：檢查底物、抗體活性，延長孵育 曲線 R2 低 / 點偏離：排查移液、標準品稀釋、孵育條件 復孔 CV 大：規范加樣、洗板，減少邊緣效應
犬（Canine）腺病毒抗體（ADV-Ab）ELISA檢測試劑盒產品貨號：DM-Can45225產品規格：48/96T上海篤瑪生物科技有限公司是專注于生命科學領域的高科技企業，秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創新為宗旨”的發展理念，致力于為全球科研工作者提供高質量的生物學試劑及解決方案。本試劑盒是公司核心產品線之一，采用自主研發的高特異性抗體對，基于經典的雙抗體夾心法原理構建，可＊＊定量檢測樣本中的含量。ELISA（酶聯免疫吸附測定，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）的核心原理是：抗原與抗體的特異性免疫反應 + 酶催化底物的化學顯色反應，通過顏色深淺定量 / 定性判斷樣本中待測物濃度。試劑盒的組成ELISA 試劑盒標準操作流程（雙抗體夾心法為例）所有操作需嚴格遵循試劑盒說明書，以下為通用標準化流程，含核心操作要點：實驗前準備提前 1 小時將試劑盒所有組分從冰箱取出，室溫（20-25℃）避光平衡至室溫，酶結合物、標準品需避免陽光直射，凍干標準品需按說明書＊＊復溶、靜置。提前開啟酶標儀、洗板機，完成校準；配制工作液：濃縮洗滌液用純水稀釋至工作濃度，底物 A/B 液按 1:1 比例臨用前新鮮混合。確定實驗布局，提前規劃標準品梯度、空白對照、陰性對照、樣本重復孔的位置，避免加樣錯誤。樣本前處理血清、血漿、細胞培養上清、組織勻漿等樣本，需按說明書要求離心、稀釋，去除沉淀、脂質、溶血雜質，降低基質效應；待測濃度超出線性范圍的樣本，需用樣本稀釋液梯度稀釋后再檢測。加樣與孵育按布局，向對應孔中加入標準品梯度液、待測樣本、對照品，每孔加樣體積＊＊一致，加樣時避免槍頭觸碰孔壁、產生氣泡，加樣完成后用封板膜嚴密封口。按說明書要求，37℃恒溫避光孵育，孵育時間嚴格遵守說明書，不可隨意延長或縮短，孵育時避免封板膜翹起、液體蒸發。洗板（核心關鍵步驟）孵育結束后，快速甩去孔內液體，在吸水紙上徹底拍干殘留液體，按說明書要求用洗滌液洗板 3-6 次，每次洗板需注滿孔、靜置 30 秒后甩干，確保洗板充分，去除未結合的游離物質。洗板不徹底會導致本底飆升、結果偏差，洗板過度會導致復合物脫落、信號偏低。加酶結合物與二次孵育每孔加入＊＊體積的酶結合物工作液，封板膜密封后，按說明書 37℃恒溫避光孵育，嚴格控制孵育時間。二次洗板重復洗板操作，洗板次數、參數嚴格按說明書執行，洗板完成后徹底拍干孔內殘留液體，無可見液滴。底物顯色每孔加入新鮮混合的底物工作液，輕輕混勻后，37℃恒溫避光孵育顯色，嚴格控制顯色時間，顯色過程需避光，避免強光導致底物自發顯色、本底升高。終止反應與讀數按順序每孔加入終止液，輕輕混勻后，藍色產物會立即變為黃色，終止后 10-30 分鐘內，用酶標儀讀取 450nm 處的 OD 值，必要時設置參比波長 630nm，降低孔間誤差。數據處理以標準品濃度為橫坐標，對應 OD 值為縱坐標，擬合四參數 Logistic 曲線（優先選擇）或線性回歸曲線，根據樣本 OD 值，計算出樣本中待測靶標的濃度，結合稀釋倍數換算＊終結果。ELISA 試劑盒核心性能評價指標這是判斷試劑盒質量、是否滿足實驗要求的核心標準，也是試劑盒研發、穩定性驗證的核心依據，呼應你之前關注的加速穩定性實驗：靈敏度：分為＊低檢出限（LOD）和定量下限（LLOQ），LOD 是可檢出靶標的＊低濃度，LLOQ 是可＊＊定量的＊低濃度，數值越低，試劑盒的檢測能力越強。特異性：通過交叉反應率評估，試劑盒與靶標結構類似物的交叉反應率越低，特異性越強，檢測結果越準確，無假陽性干擾。精密度：用變異系數（CV）評估，分為板內精密度（同一塊板同一樣本重復孔 CV≤10%）、板間精密度（同批次不同板同一樣本 CV≤15%）、批間精密度（不同批次試劑盒同一樣本 CV≤20%），CV 越低，重復性越好。準確度：用加標回收率評估，向空白基質中加入已知濃度的標準品，檢測回收率需在 80%-120% 之間，越接近 100%，定量準確性越高。線性范圍：試劑盒可＊＊定量的靶標濃度區間，實驗中樣本濃度需落在該區間內，超出范圍需稀釋后檢測。穩定性：是試劑盒有效期標定的核心，分為 4 類，也是你之前關注的加速穩定性實驗的核心應用場景：實時穩定性：試劑盒在規定保存條件下，長期存放的性能穩定性，是有效期標定的金標準。加速穩定性：37℃恒溫放置 7-14 天，模擬長期保存的老化效果，快速預判試劑盒有效期。開瓶穩定性：試劑盒開封后，按規定條件存放的性能穩定性，指導開封后的使用時限。運輸穩定性：模擬運輸過程中的溫度波動、震動等條件，驗證試劑盒的運輸耐受性。結果計算1. 首先計算每個標準品、空白孔及樣本孔的平均OD值（復孔檢測時），空白孔OD值作為陰性對照，用于扣除背景干擾。2. 以標準品濃度為橫坐標（X軸，對數坐標），對應的OD值為縱坐標（Y軸，線性坐標），使用專業繪圖軟件（如Excel、GraphPad Prism）繪制標準曲線，計算回歸方程（R2值應≥0.99，確保標準曲線的可靠性）。3. 將扣除背景后的樣本OD值代入回歸方程，計算出樣本中[檢測指標]的初步濃度，再根據樣本的稀釋倍數計算出樣本的實際濃度。售后服務上海篤瑪生物科技有限公司擁有專業的技術服務團隊，為您提供全程技術支持。如您在產品使用過程中有任何疑問，請及時聯系我們的技術顧問，我們將在24小時內響應，為您提供實驗方案優化、問題排查等專業服務。
犬（Canine）狂犬病毒抗體（RV-Ab）ELISA檢測試劑盒本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷檢測原理試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被狂犬病毒抗原的包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中狂犬病毒抗體(RV-Ab)的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1. 酶標儀（450nm）2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱操作注意事項1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3. 預處理后的樣本請按照操作步驟用樣本稀釋液適當稀釋以達到試劑盒的的＊佳檢測效果。4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無陰性對照0.5mL 0.5mL 無陽性對照0.5mL 0.5mL 無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋樣本稀釋液6mL3mL無底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無 試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2. 設置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷 1. 試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00； 陰性對照孔OD值平均值≤0.15。2. 臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.153. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性4. 陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性試劑盒性能1. 準確性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；陰性對照孔OD值平均值≤0.15，說明試驗結果有效。2. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。3. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。4. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。5. 有效期：6個月免責聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
抗豬偽狂犬病毒Mab本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷產品貨號：DM-IP004產品規格：【48T/96T】檢測原理：酶聯免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，簡稱ELISA）是一種基于抗原-抗體反應的生物化學分析技術，廣泛應用于檢測蛋白質、抗體、激素、藥物等生物分子。其檢測原理主要基于以下幾個關鍵步驟：1. 抗原-抗體特異性結合ELISA的核心是利用抗原與抗體之間的特異性結合。抗原和抗體之間通過互補的結構相互識別并結合，這種結合具有高度的特異性和親和力。例如，如果要檢測某種特定的蛋白質（抗原），就需要使用針對該抗原的特異性抗體。2. 固相化技術ELISA實驗中，抗原或抗體通常被固定在固相載體上（如塑料微孔板）。這種固相化過程使得抗原或抗體能夠穩定地吸附在微孔板表面，便于后續的反應和檢測。固相化的抗原或抗體被稱為“捕獲相”，而加入的樣本中的抗原或抗體則被稱為“檢測相”。3. 酶標記技術為了實現檢測信號的放大和可視化，ELISA中通常使用酶標記的抗體或抗原。常用的酶包括辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（AP）。酶標記的抗體或抗原與固相化的抗原或抗體結合后，酶會與底物反應，產生可檢測的信號（如顏色變化或熒光信號）。4. 底物反應與信號檢測酶與底物反應后，會產生顏色變化或熒光信號。這種信號的強度與樣本中目標分子的濃度成正比。例如，辣根過氧化物酶（HRP）可以催化過氧化氫分解，使無色的底物（如TMB）變為藍色，加入酸終止反應后變為黃色，通過分光光度計測量吸光度即可定量分析目標分子的濃度。5. 檢測模式ELISA主要有以下幾種檢測模式：直接ELISA：抗原固定在固相載體上，加入酶標記的抗體與抗原結合，＊后通過底物反應檢測信號。間接ELISA：抗原固定在固相載體上，先加入未標記的特異性抗體，再加入酶標記的二抗（針對一抗的抗體），＊后通過底物反應檢測信號。夾心ELISA：固相載體上固定捕獲抗體，加入樣本中的抗原，再加入酶標記的檢測抗體，＊后通過底物反應檢測信號。夾心ELISA是檢測蛋白質等大分子＊常用的方法。競爭ELISA：樣本中的抗原與固相載體上的抗原競爭結合酶標記的抗體，通過檢測酶標記抗體的結合量來推斷樣本中抗原的濃度。6. 定量分析ELISA的檢測結果可以通過標準曲線進行定量分析。標準曲線是通過一系列已知濃度的標準品進行檢測，繪制吸光度（或熒光強度）與濃度的關系曲線。根據樣本的吸光度或熒光強度，通過標準曲線可以計算出樣本中目標分子的濃度。?樣品收集、處理及保存方法1. ?血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. ?血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3. ?細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. ?組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5. ?保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.?酶標儀（450nm）2.?高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.?37℃恒溫箱操作注意事項1.?試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。2.??實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3.??濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，＊終結果乘以5才是樣本實際濃度。4.??嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5.??所有液體組分使用前充分搖勻試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無試劑的準備?20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法1.??手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2.??自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟?結果判斷繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.??準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。2.??特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。3.??重復性：板內、板間變異系數均小于15%。4.??貯藏：2-8℃，避光防潮保存。5.??有效期：6個月免責聲明1.???試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。2.???嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。技術支持電話：400-9681786電子郵件：dm_support@sina.com網址：www.szhwd.com.cn生產廠家：上海篤瑪生物科技有限公司?
犬（Canine）狂犬病毒 (RV) ELISA檢測試劑盒本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷檢測原理試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被狂犬病毒抗體的包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中狂犬病毒的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1. 酶標儀（450nm）2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱操作注意事項1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3. 預處理后的樣本請按照操作步驟用樣本稀釋液適當稀釋以達到試劑盒的的＊佳檢測效果。4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無陰性對照0.5mL 0.5mL 無陽性對照0.5mL 0.5mL 無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋樣本稀釋液6mL3mL無底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無 試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2. 設置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷 1. 試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00； 陰性對照孔OD值平均值≤0.15。2. 臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.153. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性4. 陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性試劑盒性能1. 準確性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；陰性對照孔OD值平均值≤0.15，說明試驗結果有效。2. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。3. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。4. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。5. 有效期：6個月免責聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
豬（Porcine）偽狂犬病病毒抗體（PRV-Ab）ELISA檢測試劑盒本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷檢測原理試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被豬偽狂犬病病毒抗原包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中豬偽狂犬病病毒抗體（PRV-Ab）的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1. 酶標儀（450nm）2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱操作注意事項1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3. 預處理后的樣本請按照操作步驟用樣本稀釋液適當稀釋以達到試劑盒的的＊佳檢測效果。4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無陰性對照0.5mL 0.5mL 無陽性對照0.5mL 0.5mL 無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋樣本稀釋液6mL3mL無底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無 試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法1. 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2. 設置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷 1. 試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00； 陰性對照孔OD值平均值≤0.15。2. 臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.153. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性4. 陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性試劑盒性能1. 準確性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；陰性對照孔OD值平均值≤0.15，說明試驗結果有效。2. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。3. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。4. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。5. 有效期：6個月免責聲明1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
犬（Canine）5羥色胺（5-HT）ELISA檢測試劑盒本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷產品貨號：【DM-Can45213】產品規格：【48T/96T】檢測范圍：反應性：Canine檢測范圍：6.43-480 ng/mL靈敏度： ＊低檢測濃度小于1.0 ng/mL檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被5羥色胺（5-HT）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5羥色胺（5-HT）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，＊終結果乘以5才是樣本實際濃度。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、30、60、120、240、480 ng/mL試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟 結果判斷繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。靈敏度：＊低檢測濃度小于1.0 pg/mL。特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。重復性：板內、板間變異系數均小于15%。貯藏：2-8℃，避光防潮保存。有效期：6個月免責聲明試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。技術支持電話：400-9681786電子郵件：dm_support@sina.com網址：www.szhwd.com.cn生產廠家：上海篤瑪生物科技有限公司
犬（Canine）犬尿氨酸（Kynurenine）ELISA檢測試劑盒本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷產品貨號：【DM-Can45211】產品規格：【48T/96T】檢測范圍：反應性：Canine檢測范圍：7.13-480 pg/mL靈敏度： ＊低檢測濃度小于1.0 pg/mL檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被犬尿氨酸（Kynurenine）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成＊終的黃色。顏色的深淺和樣品中的犬尿氨酸（Kynurenine）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，＊終結果乘以5才是樣本實際濃度。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5. 所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、30、60、120、240、480 pg/mL試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟 結果判斷繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。靈敏度：＊低檢測濃度小于1.0 pg/mL。特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。重復性：板內、板間變異系數均小于15%。貯藏：2-8℃，避光防潮保存。有效期：6個月免責聲明試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。技術支持電話：400-9681786電子郵件：dm_support@sina.com網址：www.szhwd.com.cn生產廠家：上海篤瑪生物科技有限公司
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