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淀粉含量檢測試劑盒說明書

淀粉含量檢測試劑盒說明書可見分光光度法注意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。貨號:DM-SP10018規格:50T/48S產品內容:試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;標準品:粉劑×10mg支,4℃保存;臨用前加入 1mL 蒸餾水溶解,制備 10mg/mL 葡萄糖標準液。產品說明:淀粉是植物中糖的主要儲存形式,其含量測定對于評價食品營養價值和調查植物體內糖代謝都 有重要意義。利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖,采 用蒽酮比色法測定葡萄糖含量,即可計算淀粉含量。需自備的儀器和用品:可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸(不允許快遞)、 蒸餾水。操作步驟:一、淀粉提取:1 、稱取約 0. 1g 樣品于研缽中研碎,加入 1mL 試劑一,充分勻漿后轉移到 EP 管中,80℃水浴提取 30min ,3000g ,常溫離心 5min ,棄上清,留沉淀。2 、沉淀中加入0.5mL 雙蒸水,放入沸水浴中糊化 15min(蓋緊,以防止水分散失)。3 、冷卻后,加入 0.35mL 試劑二,常溫提取 15min ,振蕩 3-5 次。4 、加入 0.85mL 雙蒸水,混勻,3000g ,常溫離心 10min ,取上清液。5 、取上清液 100μL 加入 700μL 蒸餾水后即進行了八倍稀釋測定。注:若稀釋八倍后樣品吸光度大 于 1.5 或小于 0.1 ,建議將樣品再進行適當稀釋或濃縮后測量。標準溶液準備:將10mg/mL 葡萄糖標準液進行二倍稀釋得到 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、 0.00156mg/mL 標準溶液備用。二、測定操作表:1 、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 620nm ,蒸餾水調零。2 、調節水浴鍋至 95℃。3 、工作液的配制:臨用前在試劑三中加入 13.5mL 蒸餾水后,緩慢加入 76.5mL 濃硫酸,不斷攪拌, 充分溶解,待用。4 、標準品測定:取 0.2mL 標準溶液(蒸餾水做空白)和 1mL 工作液至 EP 管中,95℃水浴 10 min  (蓋緊,防止水分散失),自然冷卻至室溫,在 620 nm波長下測定吸光度值 A 標準及A 空白。計算 ΔA=A 標準-A 空白。5 、樣本測定:取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中,95℃水浴10 min(蓋緊,防止水分散失), 自 然冷卻至室溫,在620 nm  波長下測定吸光度值A測定。ΔA′=A測定- A空白。三、淀粉含量計算:1 、標準曲線繪制:以 0.2 、0.1 、0.05 、0.025 、0.0125 、0.00625 、0.003125 、0.00156mg/mL 葡萄糖標準溶液為橫坐  標,ΔA 為縱坐標繪制標準曲線,得到線性回歸方程 y=kx+b ,將ΔA′代入方程得到 x(mg/mL); 2、 淀粉含量計算:(1)、按照蛋白濃度計算淀粉含量(mg/mg prot)=x×稀釋倍數×V 提取÷(Cpr×V 提取)=8x÷Cpr2 、按樣本鮮重計算淀粉含量(mg/g 鮮重)=x×稀釋倍數×V 提取÷W= 13.6x÷WV 提取:提取后體積,1.7 mL;Cpr:樣本提取后蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品質量,g;稀釋倍數:8。注意事項:由于工作液具有強腐蝕性,請謹慎操作。本產品僅供科學研究使用!請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途!

植物蔗糖含量檢測試劑盒

植物蔗糖含量檢測試劑盒說明書可見分光光度法注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。貨號:DM-SP10019規格:50T/48S產品內容:提取液:液體 100ml×1  瓶,4℃保存;試劑一:粉劑10mg×1支 ,4℃保存,臨用前加1mL蒸餾水溶解,用水稀釋10倍,備用,即1mg/mL。試劑二:液體2.5ml×1 瓶,4℃保存;試劑三:液體 40ml×1 瓶,4℃保存; 試劑四:液體 10ml×1 瓶,4℃保存; 試劑五:粉劑0.5g×1 瓶,常溫保存。產品說明:蔗糖是植物光合作用的主要產物,也是糖分運輸和儲藏的主要形式。因此,測定蔗糖含量對于植物糖代謝具有重要意義。此外,蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等產品質量控制的重要指標之一。先用堿與樣品共熱,破壞其中的還原糖。然后在酸性條件下將蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖進一步與間苯二酚反應,生成有色物質,在480nm 下有特征吸收峰。自備實驗用品:可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。操作步驟:一、 蔗糖的提取稱取0.1~0.2g 樣本,常溫研碎,加入1mL 提取液,適當研磨后快速轉移到離心管中,置于80℃ 水浴鍋中10min,振蕩3~5 次,冷卻后,4000g,25℃離心10min,取上清,加入2mg試劑五,80℃脫色30min,再加入1mL 提取液,4000g,25℃離心10min,取上清液測定。二、 測定操作混勻,沸水浴 30min,冷卻后 480nm 處蒸餾水調零,空白管、標準管和測定管分別記為 A1、A2 和 A3。三、 蔗糖含量計算:1、 按照蛋白質含量計算蔗糖含量(mg/mg prot)=(C 標準管)×V1×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr此法需要自行測定蛋白濃度。2、按照樣品質量計算蔗糖含量(mg/g 鮮重)=(C 標準×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W。C 標準管:標準管濃度,1mg/mL;V1:加入樣本體積,0.1mL;V2:加入提取液體積,2mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。注意:當測定 OD480 超過 1.6 時,建議稀釋后測定。

可溶性酸性轉化酶(Soluble acid invertase, S-AI)試劑盒

可溶性酸性轉化酶(Soluble acid invertase, S-AI)試劑盒說明書可見分光光度法 貨號:DM-SP10021                                        規格:50 管/24 樣正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:蔗糖轉化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖 代謝關鍵酶之一。根據*適 pH,Ivr 分為酸性轉化酶(AI)和中性轉化酶(NI)兩種類型。AI 的*適 pH 為 3~5。AI 分為可溶性 AI(S-AI)和細胞壁不溶性 AI(B-AI)兩種類型。 S-AI 主要存在于細胞液泡或自由空間中,*適 pH 為 4.5~5.0(酸性),通過降解液泡中蔗 糖,調節液泡中蔗糖的利用和果實內糖類的積累。測定原理:S-AI 催化蔗糖降解產生還原糖,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在 510nm有特征光吸收,在一定范圍內 510nm 光吸收增加速率與 S-AI 活性成正比。 自備用品:可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 試劑組成和配制:提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入25mL試劑一充分溶解備用;用不完的試劑 4℃ 保存;試劑三:液體 30mL×1 瓶,4℃保存;粗酶液提取:按照組織質量( g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL 提取液),進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。測定步驟和加樣表:試劑名稱 (μL)測定管對照管樣本200200試劑一800試劑二800混勻, 37℃準確水浴 30min 后,95℃水浴 10min(蓋緊,以防水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)試劑三500500混勻,95℃水浴 10min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻,510nm 處,蒸 餾水調零,記錄各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸餾水稀釋后測定(計算公式中乘 以相應稀釋倍數),ΔA=A 測定-A 對照。S-AI 活性計算:標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.0016x -0.001;x 為標準品濃度 (μg/mL),y 為吸 光值。(1)按蛋白濃度計算:單位的定義:37℃每mg蛋白每分鐘產生1μg還原糖定義為一個酶活性單位。S-AI 活性 (μg/min/mg prot)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T =20.8×(ΔA +0.001)÷Cpr(2)按鮮重計算:單位的定義:37℃每g組織每分鐘產生1μg還原糖定義為一個酶活性單位。S-AI 活性 (μg/min/g 鮮重)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(W ×V1÷V2) ÷T=20.8×(ΔA +0.001)÷WV1:加入反應體系中樣本體積,0.2mL;V2:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,30min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。

葡萄糖含量檢測試劑盒

葡萄糖含量檢測試劑盒說明書 注意:正式測定前務必取2-3 個預期差異較大的樣本做預測定貨號:DM-SP10020規格:50T/48S 產品簡介:可見分光光度法葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產生葡萄糖。就哺乳動物而言,葡萄糖不僅是大腦神經系統、肌肉、脂肪組織等的唯一能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化 4-氨基安替比林偶聯酚,生成有色化合物,在 505 nm 有特征吸收峰。試驗中所需的儀器和試劑:可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。產品內容:試劑一:葡萄糖 9mg×1支,4℃保存;臨用前加入1ml蒸餾水充分溶解為50μmol/mL 葡萄糖溶液,用蒸餾水稀釋為 0.5μmol/mL 葡萄糖溶液 -20℃ 保存;試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;試劑三:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;混合試劑的配制:使用前將試劑二和試劑三 1:1 等體積混合,用多少配多少。操作步驟:一、葡萄糖提取:1、組織的處理:稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 蒸餾水研磨成勻漿,置沸水浴中煮沸 10 分鐘(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,8000g,常溫離心 10min,取上清液備用。2、細菌或細胞處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):蒸餾水體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 蒸餾水), 超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3S,間隔 10S,重復 30 次),置沸水浴中煮沸 10  分鐘(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心 10min,取上清液備用。二、測定操作表:1、分光光度計預熱 30min。波長調至 505nm,蒸餾水調零。2、在 1.5mL 離心管中依次加入下列試劑:試劑(μL)空白管標準管測定管樣本100試劑一100蒸餾水100混合試劑900900900混勻,置 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴中,保溫 15min,于 505nm 波長處讀取吸光度。 葡萄糖含量計算:1、按蛋白濃度計算葡萄糖含量(μmol/mg prot)=C ×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 樣÷(Cpr×V樣)=0.5×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷Cpr2、按樣本鮮重計算葡萄糖含量(μmol/g 鮮重)=C ×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ×V 樣÷(W÷V樣總×V 樣)=0.5 ×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷W3、按細菌或細胞數量計算葡萄糖含量(μmol/104 cell)=C ×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ×V 樣÷(500÷V樣總×V 樣)=0.001 ×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)C:葡萄糖溶液濃度,0.5μmol/mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;V 樣:加入的樣本體積,100μL=0.1mL;V 樣總:樣本總體積,1mL;W:樣本鮮重,g;500:細菌或細胞數量,500 萬。4、若 A 測定管大于 1.5,稀釋后進行實驗。 

丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量試劑盒

丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量試劑盒說明書微量法 貨號:DM-W-A401                                             規格:100管/96樣正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:氧自由基作用于脂質的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質;后者逐漸分解為一系列復雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質氧化的水平。測定原理:MDA與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產物,在532nm有*大吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算 MDA 的含量。需自備的儀器和用品:可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。試劑的組成和配置:提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;試劑一:液體 30mL×1 瓶,4℃保存;注意事項:臨用前注意試劑一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃加熱,并振蕩以促進溶解。MDA 提取:1、細菌、細胞或組織樣品的制備:細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。2、血清(漿)樣品:直接檢測。測定步驟:1、吸取0.3mL試劑一于1.5mL離心管中,再加入0.1mL樣本, 混勻。2、95℃水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),置于冰浴中冷卻,10000g,25℃,離心10min。3、吸取200μL上清液于微量石英比色皿或96孔板中,測定532nm和600nm處的吸光度,記為A532 和A600,ΔA= A532-A600。MDA 含量計算:a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下1、血清(漿)中 MDA 含量的計算:MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣=25.8×ΔA2、細菌、細胞或動物組織中 MDA 含量計算(1)按照蛋白濃度計算MDA含量(nmol/mg prot)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣)=25.8×ΔA ÷Cpr需要另外測定,建議使用本公司 BCA 蛋白質含量測定試劑盒。(2)按照樣品質量計算MDA含量(nmol/g 鮮重)=[ ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W×V樣÷V樣總)=25.8×ΔA ÷W(3 ) 按照細菌或細胞密度計算:MDA含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總)=0.0516×ΔAV 反總:反應體系總體積, 4×10-4L;ε:丙二醛摩爾消光系數,155×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500萬。b.用96 孔板測定的計算公式如下1、血清(漿)中 MDA 含量的計算:MDA含量(nmol/mL)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣=51.6×ΔA2、細菌、細胞或動物組織中 MDA 含量計算(1)按照蛋白濃度計算MDA含量(nmol/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣)=51.6×ΔA÷Cpr需要另外測定,建議使用本公司BCA蛋白質含量測定試劑盒。(2)按照樣品質量計算MDA含量(nmol/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W×V樣÷V樣總)=51.6×ΔA÷W(3 ) 按照細菌或細胞密度計算:MDA含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總)=0.1032×ΔAV 反總:反應體系總體積,4×10-4L;ε:丙二醛摩爾消光系數,155×103L/mol/cm;d:96孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500 萬。 技術支持電話:400-9681786電子郵件:dm_support@sina.com網址:www.szhwd.com.cn生產廠家:上海篤瑪生物科技有限公司

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