DEPC 處理水(0.1%)DEPC 處理水(0.1%)是用 0.1% 的焦碳酸二乙酯(DEPC)處理過并經高溫高壓滅菌的超純水,不含 RNase、DNase 和 proteinase。以下是詳細介紹:制備方法:通常將 1ml DEPC 溶于 1L 純凈水中,使其終濃度為 0.1%,猛烈振搖后,于室溫靜止數小時或過夜,再經高壓滅菌處理,DEPC 會分解為二氧化碳和乙醇,從而得到 DEPC 處理水。性質特點:為無色液體,折射率為 1.398(20°C),密度約 1.12g/ml。DEPC 處理水應儲存在干凈、無 RNA 酶的容器中,可室溫保存,也可在 2-8°C 保存,注意避光干燥密閉。作用原理:DEPC 能與 RNA 酶的活性基團組氨酸的咪唑環反應,從而使 RNA 酶失活,有效防止 RNA 被降解,保證 RNA 樣品的完整性和實驗結果的可靠性。主要用途:常用于 RNA 沉淀的溶解,以及含有 RNA 的各種反應體系,如反轉錄、siRNA 的退火等,還可用于清洗和浸泡移液槍頭、離心管等實驗器材,也可在 RNA 提取過程中用于溶解 RNA 樣品和洗滌 RNA。注意事項:DEPC 氣味芳香濃烈,具有強揮發性和毒性,是潛在的致癌物質,操作時應在通風櫥中進行,并佩戴乳膠手套和口罩,避免接觸皮膚。此外,含有 Tris 緩沖液的溶液中不能加入 DEPC,因為 DEPC 會與 Tris 中的伯胺基反應,無法實現對 RNA 酶的滅活處理。