豬血漿(去紅細胞、無菌過濾)規格:500ml/瓶保質期: 五年如何解凍血清才不會使產品質量受損? 將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。1.實驗時根據試驗的情況和性質進行必要的防護。根據試驗可能發生的危險事故佩戴必要的防護工具,例如穿好試驗服,戴橡膠手套,防護面具,防毒面具等。實驗前,要注意清理試驗場周圍的安全隱患。檢查試驗裝置、藥品和相關物品是否有不符合要求的情況等。 2.遵循化學藥品的性質和化學反應的規律,不盲目蠻干和主觀臆測化學反應的過程。應根據化學反應的性質和過程選擇匹配的反應裝置,不可圖省事省去必要的安全措施。 實驗事故雖不可預測,但其危險性的大小是可以估計到的。保存方法:(1)長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。 (2)一般 提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。(3)血清解凍: 瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。血清的保留應當留意以下幾點:1需求長時間保存的血清有必要儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超越1個月.因為血清結冰時體積會添加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留必定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂.2.熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全凍住的血清.加熱過程中須規矩搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非有必要,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會構成血清堆積物明顯增多,而且還會影響血清的質量.補體參與反響有:細胞毒作用, 滑潤肌細胞縮短, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬作用, 推動和發生化學趨化和活化.3.瓶裝血清凍住需選用逐步凍住法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(當心勿構成氣泡),使溫度與成分均一,削減堆積的發生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍住,這么因溫度改動太大,簡略構成蛋白質凝集而出現堆積.4.一般 供應的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發現血清有懸浮物,則可將血清參加培養液內一同過濾,切勿直接過濾血清.5.血清中的堆積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍住后血清中纖維蛋白構成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm, 5分鐘去掉,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":通過熱處理過的血清,堆積物的構成會明顯增多.有些堆積物在顯微鏡下查詢象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但假如懷疑血清質量,則應當即停止使用,替換另一批號的血清.6.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,一同血清中的有效成分會破會而影響血清質量背景豬血清系采用成年健康豬血液為原料加工而成,經無菌采集、分離、微孔過濾分裝而成。無支原體、無噬菌體,內毒素含量低于50EU/ml。豬血清(無菌過濾)在細胞培養中的作用:1.提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。2.提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。4.對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發現的,現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。豬血漿(去紅細胞、無菌過濾)使用注意事項1.血清解凍采用逐步解凍法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解凍過程中必須隨時輕搖,使血清受熱溫度均勻。2. 血清凝絮物,血清解凍后會出現少量片狀或絮狀物析出,這主要是由于血清內不穩定蛋白變性、纖維蛋白析出形成沉淀物,實驗證明沉淀物不會影響血清本身質量。;3. 熱滅活本產品除注明外均未滅活。如果必須滅活,請嚴格按照56℃30分鐘(水浴)處理已解凍血清。4. 常溫狀態下短期融化并不會影響血清質量。5.產品有效期,檢定合格之日起有效期5年。解凍血清:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。二、保存血清:血清應保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。豬血清(無菌過濾)注意事項:(1)有少量蛋白質結塊析出不影響使用。未融化或融化未經搖勻的血清禁止直接放入高溫水浴內加溫。減少血清重復凍融。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。(2)長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。(3)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。介紹 疫苗在預防豬常見傳染病方面起著非常重要的作用。 它包括豬瘟疫苗、豬肺炎支原體疫苗以及正處在研發熱點中的非洲豬瘟等疫苗。 在豬病毒疫苗和肺炎支原體疫苗生產中,血清是常見的生產細胞用的培養液成分。 尤其是豬血清,常用于豬肺炎支原體疫苗的生產。在對細胞和活疫苗進行支原體檢驗中,《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗用液體培養基的組成成分。并且,《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗】中需要陰性血清,即正常豬血清。 在豬瘟疫苗等其他豬病毒疫苗的生產中,常用豬腎細胞(PK-15)或豬睪丸細胞(ST)進行病毒的繁殖。其培養液除添加MEM外,常添加新生牛血清。但從品系相同的角度來看,豬血清更為合適。 實際上早在1989年,國外就建議用豬血清取代牛血清,用于培養制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》 1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應。
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