標(biāo)準(zhǔn)豬血清(細(xì)菌培養(yǎng)專用)規(guī)格:500ml/瓶保質(zhì)期: 五年如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損? 將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。1.實(shí)驗(yàn)時(shí)根據(jù)試驗(yàn)的情況和性質(zhì)進(jìn)行必要的防護(hù)。根據(jù)試驗(yàn)可能發(fā)生的危險(xiǎn)事故佩戴必要的防護(hù)工具,例如穿好試驗(yàn)服,戴橡膠手套,防護(hù)面具,防毒面具等。實(shí)驗(yàn)前,要注意清理試驗(yàn)場(chǎng)周圍的安全隱患。檢查試驗(yàn)裝置、藥品和相關(guān)物品是否有不符合要求的情況等。 2.遵循化學(xué)藥品的性質(zhì)和化學(xué)反應(yīng)的規(guī)律,不盲目蠻干和主觀臆測(cè)化學(xué)反應(yīng)的過(guò)程。應(yīng)根據(jù)化學(xué)反應(yīng)的性質(zhì)和過(guò)程選擇匹配的反應(yīng)裝置,不可圖省事省去必要的安全措施。 實(shí)驗(yàn)事故雖不可預(yù)測(cè),但其危險(xiǎn)性的大小是可以估計(jì)到的。保存方法:(1)長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?nbsp;(2)一般 提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。(3)血清解凍: 瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。血清的保留應(yīng)當(dāng)留意以下幾點(diǎn):1需求長(zhǎng)時(shí)間保存的血清有必要儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超越1個(gè)月.因?yàn)檠褰Y(jié)冰時(shí)體積會(huì)添加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留必定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?2.熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全凍住的血清.加熱過(guò)程中須規(guī)矩?fù)u晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非有必要,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)構(gòu)成血清堆積物明顯增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反響有:細(xì)胞毒作用, 滑潤(rùn)肌細(xì)胞縮短, 肥大細(xì)胞和血小板開(kāi)釋組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 推動(dòng)和發(fā)生化學(xué)趨化和活化.3.瓶裝血清凍住需選用逐步凍住法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷悄悄搖晃均勻(當(dāng)心勿構(gòu)成氣泡),使溫度與成分均一,削減堆積的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃凍住,這么因溫度改動(dòng)太大,簡(jiǎn)略構(gòu)成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)堆積.4.一般 供應(yīng)的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清參加培養(yǎng)液內(nèi)一同過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.5.血清中的堆積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍住后血清中纖維蛋白構(gòu)成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去掉,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":通過(guò)熱處理過(guò)的血清,堆積物的構(gòu)成會(huì)明顯增多.有些堆積物在顯微鏡下查詢象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但假如懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)當(dāng)即停止使用,替換另一批號(hào)的血清.6.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,一同血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)豬血清(細(xì)菌培養(yǎng)專用)背景豬血清系采用成年健康豬血液為原料加工而成,經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過(guò)濾分裝而成。無(wú)支原體、無(wú)噬菌體,內(nèi)毒素含量低于50EU/ml。豬血清(無(wú)菌過(guò)濾)在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:1.提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。2.提供激素和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。3.提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。4.對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。使用注意事項(xiàng)1.血清解凍采用逐步解凍法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解凍過(guò)程中必須隨時(shí)輕搖,使血清受熱溫度均勻。2. 血清凝絮物,血清解凍后會(huì)出現(xiàn)少量片狀或絮狀物析出,這主要是由于血清內(nèi)不穩(wěn)定蛋白變性、纖維蛋白析出形成沉淀物,實(shí)驗(yàn)證明沉淀物不會(huì)影響血清本身質(zhì)量。;3. 熱滅活本產(chǎn)品除注明外均未滅活。如果必須滅活,請(qǐng)嚴(yán)格按照56℃30分鐘(水浴)處理已解凍血清。4. 常溫狀態(tài)下短期融化并不會(huì)影響血清質(zhì)量。5.產(chǎn)品有效期,檢定合格之日起有效期5年。解凍血清:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。二、保存血清:血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。豬血清(無(wú)菌過(guò)濾)注意事項(xiàng):(1)有少量蛋白質(zhì)結(jié)塊析出不影響使用。未融化或融化未經(jīng)搖勻的血清禁止直接放入高溫水浴內(nèi)加溫。減少血清重復(fù)凍融。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。(2)長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选#?)一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。介紹 疫苗在預(yù)防豬常見(jiàn)傳染病方面起著非常重要的作用。 它包括豬瘟疫苗、豬肺炎支原體疫苗以及正處在研發(fā)熱點(diǎn)中的非洲豬瘟等疫苗。 在豬病毒疫苗和肺炎支原體疫苗生產(chǎn)中,血清是常見(jiàn)的生產(chǎn)細(xì)胞用的培養(yǎng)液成分。 尤其是豬血清,常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。在對(duì)細(xì)胞和活疫苗進(jìn)行支原體檢驗(yàn)中,《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗(yàn)用液體培養(yǎng)基的組成成分。并且,《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗(yàn)】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗(yàn)】中需要陰性血清,即正常豬血清。 在豬瘟疫苗等其他豬病毒疫苗的生產(chǎn)中,常用豬腎細(xì)胞(PK-15)或豬睪丸細(xì)胞(ST)進(jìn)行病毒的繁殖。其培養(yǎng)液除添加MEM外,常添加新生牛血清。但從品系相同的角度來(lái)看,豬血清更為合適。 實(shí)際上早在1989年,國(guó)外就建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細(xì)胞(見(jiàn)《動(dòng)物檢疫》 1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽(yáng)性反應(yīng)》),原因是牛血清中的白蛋白會(huì)干擾非洲豬瘟抗體的檢測(cè),造成假陽(yáng)性反應(yīng)。
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